Tre-DST: A new drug susceptibility test for Mycobacterium tuberculosis using solvatochromic trehalose probes

Туберкулез (ТБ) является самой распространенной причиной смерти в статистике смертности по отдельным инфекционным возбудителям. По оценкам, в 2024 году туберкулезом заболели около 10 миллионов человек, из них почти полмиллиона были инфицированы лекарственно-устойчивым туберкулезом (ЛУ-ТБ). Раннее выявление инфекции и лекарственной устойчивости имеет решающее значение для борьбы с ЛУ-ТБ, поскольку позволяет быстро начать эффективное лечение. В настоящее время основными методами диагностики инфекции остаются бактериальный посев и анализ нуклеиновых кислот, а микроскопия мазков постепенно отменяется.

Однако эти методы имеют существенные ограничения диагностики лекарственной устойчивости, например: длительное время получения результатов фенотипических тестов, а также необходимость предварительного знания мутаций, обуславливающих резистентность, и непомерно высокая стоимость молекулярных тестов.

Для решения этой проблемы авторы разработали быстрый фенотипический тест на чувствительность к противотуберкулезным препаратам, названный Tre-DST (Тре-ТЛЧ), основанный на новых трегалозных зондах, которые при метаболическом превращении испускают усиленный флуоресцентный сигнал, что дает им уникальную способность специфически обнаруживать живые микобактерии.

Авторы использовали непатогенную Mycobacterium smegmatis и аттенуированную по вирулентности Mycobacterium tuberculosis (МТБ) H37Ra или ауксотрофную МТБ, чтобы продемонстрировать сильную корреляцию между результатами экономически эффективного планшетного ридера и данными проточной цитометрии, что позволяет предположить, что флуоресцентный планшетный ридер является подходящим детектором флуоресценции для Тре-ТЛЧ. Авторы определили, что добавление одной недели инкубации для МТБ позволило образцам, изначально посеянным в концентрации 104 КОЕ/мл, стать обнаруживаемыми более чем на две недели раньше, чем при анализе колониеобразующих единиц. Важной находкой было то, что Тре-ДСТ предоставляет данные о лекарственной чувствительности безотносительно препарата, демонстрируя потерю флуоресценции при использовании противотуберкулезных препаратов первой линии рифампицина (Р), изониазида (И) и этамбутола, а также нового препарата бедаквилина.

Наконец, метод Тре-ДСТ позволил отличать ауксотрофы, устойчивые к Р и И, от чувствительных контрольных препаратов и точно определять наличие резистентности. В конечном итоге, поскольку метод Тре-ДСТ не учитывает механизмы лекарственной устойчивости, этот анализ, вероятно, совместим со всеми рекомендованными ВОЗ препаратами для лечения ЛУ-ТБ, а в будущем и с любыми новыми противотуберкулезными препаратами как диагностический метод в референсных лабораториях.

Неофициальный перевод: АНО «Здоровье.ру» 2025.

Смотреть полный текст статьи в оригинале на сайте публикатора (на англ. языке).

Полные данные (заголовок, авторы, дата и источник публикации):